本发明涉及胶原蛋白制备
技术领域：
，尤其涉及一种用于制备胶原蛋白的牛筋片的清洗方法。
背景技术：
：近年来，胶原蛋白在食品、医药、组织工程、化妆品等领域获得了广泛的应用。随着胶原蛋白需求量的增加，牛筋作为胶原蛋白提取的的主要原材料，牛筋的清洗效果对提取工艺有着至关重要的影响。切片后的牛筋，含有脂肪、血清和微生物等，且牛筋质地柔软、光滑，因此，现有技术对于牛筋片的清洗，普遍采用手工清洗的方式。手工清洗时间长，效率低，清洗剂对人皮肤造成一定的损伤，且容易引入微生物。技术实现要素：本发明针对现有手工清洗牛筋片效率低、劳动强度大、清洗过程对手部皮肤损伤大且会向牛筋片中引入其它微生物的问题，并针对牛筋片质地柔软、光滑且含有脂肪、血清和微生物等特点，提供一种牛筋片的清洗方法。为实现上述目的，本发明采用以下技术方案。一种牛筋片的清洗方法，包括对牛筋片进行一阶清洗后，再对牛筋片进行至少一次二阶清洗。所述一阶清洗包括以下步骤：s1、将牛筋片与清洗剂置于清洗槽中，并通过搅拌器以正向搅拌和反向搅拌交替进行的方式搅拌清洗槽内的牛筋片2h以上，正向搅拌与反向搅拌的时间间隔为5-30min，搅拌转速为10-50rpm；然后排掉清洗槽内的废液。优选的，所述牛筋片的厚度为1-5mm，牛筋片的长和宽为10-30mm。更优选的，所述牛筋片的长和宽均为10mm。优选的，所述清洗剂是碳酸钠溶液或氢氧化钠溶液。优选的，所述碳酸钠溶液的质量百分浓度为0.001-1.0％；所述氢氧化钠溶液的质量百分比浓度为0.001-0.1％。更优选的，所述清洗剂是质量百分浓度为0.001-1.0％的碳酸钠溶液时，清洗槽内碳酸钠溶液与牛筋片的体积比为1:1。s2、向清洗槽内加入纯化水，用纯化水清洗牛筋片1h以上，然后排掉清洗槽内的废液。优选的，向清洗槽内注入纯化水并以流动水冲洗的方式冲洗牛筋片30min，然后向清洗槽内加入纯化水以浸泡牛筋片并通过搅拌器搅拌清洗槽内的牛筋片。更优选的，以流动水冲洗的方式冲洗牛筋片30min后，向清洗槽内加入纯化水以浸泡牛筋片并以正向搅拌和反向搅拌交替进行的方式通过搅拌器搅拌清洗槽内的牛筋片，正向搅拌与反向搅拌的时间间隔为20min，搅拌转速为10-50rpm，且每20min更换一次清洗槽内的纯化水。所述二阶清洗包括以下步骤：s3、向清洗槽内加入清洗剂，并通过搅拌器以正向搅拌和反向搅拌交替进行的方式搅拌清洗槽内的牛筋片2h以上，正向搅拌与反向搅拌的时间间隔为5-30min，搅拌转速为10-50rpm；然后排掉清洗槽内的废液。优选的，所述清洗剂是碳酸钠溶液或氢氧化钠溶液。优选的，所述碳酸钠溶液的质量百分浓度为0.001-1.0％。更优选的，所述清洗剂是质量百分浓度为0.001-1.0％的碳酸钠溶液时，清洗槽内碳酸钠溶液与牛筋片的体积比为1:1。s4、向清洗槽内加入纯化水，用纯化水清洗牛筋片2.5h以上，然后排掉清洗槽内的废液，完成牛筋片的清洗。优选的，向清洗槽内注入纯化水并以流动水冲洗的方式冲洗牛筋片15min，然后向清洗槽内加入纯化水以浸泡牛筋片并通过搅拌器搅拌清洗槽内的牛筋片。更优选的，以流动水冲洗的方式冲洗牛筋片15min后，向清洗槽内加入纯化水以浸泡牛筋片并以正向搅拌和反向搅拌交替进行的方式通过搅拌器搅拌清洗槽内的牛筋片，正向搅拌与反向搅拌的时间间隔为20min，搅拌转速为10-50rpm，且前三次更换清洗槽内的纯化水的时间间隔为20min，之后每30min更换一次清洗槽内的纯化水。优选的，上述清洗方法中，用桨叶呈s型的搅拌器搅拌清洗槽内的牛筋片，所述搅拌器的搅拌轴呈水平设置。与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明通过以一定的搅拌速度并以一定时间间隔正向搅拌和反向搅拌交替搅拌浸泡在清洗剂中的牛筋片，实现了以搅拌器搅拌方式替代手工搓洗方式亦可保障牛筋片的清洗效果，牛筋片的清洁度符合生产要求。通过本发明方法清洗牛筋片，不仅牛筋片的清洁效果好，且极大的降低了清洗牛筋片的劳动强度，并因采用机械清洗取代手工清洗，可避免清洗试剂对操作人员的手部皮肤造成损伤，以及可避免清洗过程中由清洗牛筋片的操作人员引入其它微生物，保障清洗效果。附图说明图1为实施例中使用的清洗槽与搅拌器的结构示意图；其中，1-清洗槽，2-搅拌轴，3-桨叶。具体实施方式为了更充分的理解本发明的技术内容，下面结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步介绍和说明。实施例1本实施例提供一种利用槽型混合机中的搅拌器搅拌清洗牛筋片的方法。槽型混合机中的清洗槽1与搅拌器的结构如图1所示，搅拌器的桨叶3呈s型，搅拌器的搅拌轴2呈水平设置。实施例1的清洗步骤如下：s1、将牛筋片(长10-30cm，宽10-30cm，厚1-5cm)与碳酸钠溶液置于清洗槽1中，并通过搅拌器搅拌清洗槽1内的牛筋片2h以上，然后排掉清洗槽1内的废液；s2、向清洗槽1内加入纯化水，用纯化水清洗牛筋片1h以上，然后排掉清洗槽1内的废液；s3、向清洗槽1内加入碳酸钠溶液，并通过搅拌器搅拌清洗槽1内的牛筋片2h以上，然后排掉清洗槽1内的废液；s4、向清洗槽1内加入纯化水用纯化水清洗牛筋片2.5h以上，然后排掉清洗槽1内的废液，完成牛筋片的清洗。实施例1的清洗流程及手工清洗方式的对比例1的清洗流程如下表1所示。表1实施例1和对比例1的清洗流程分别检测由实施例1和对比例1清洗后的牛筋片样品中的可溶性非胶原成分、微生物含量。一、考马斯亮蓝g250检测可溶性非胶原成分1、配制牛血清白蛋白标准液1mg/ml、配制考马斯亮蓝g250染色液(表2)。2、绘制标准曲线，在吸光度595nm处进行吸光值检测(表3)。表20-100ug/ml123456标准蛋白(ml)00.020.040.060.080.1纯化水(ml)10.980.960.940.920.9考马斯g250(ml)555555蛋白含量(ug/ml)020406080100表33、牛筋待测样品制备及检测牛筋与纯化水按1g:1ml的比例称量混合，放入摇床，30℃、100rpm、5h。检测结果如表4所示。表4样品a1a2a3浓度ug/ml对比例10.1990.1870.17819.16实施例10.1940.1800.18318.71二、微生物含量检测按照《中国药典》2015版进行检测，检测结果如表5所示。表5样品微生物含量(cuf/g)对比例120实施例110实施例2本实施例提供一种利用槽型混合机中的搅拌器搅拌清洗牛筋片的方法。槽型混合机中的清洗槽1与搅拌器的结构与实施例1的相同。实施例2的清洗步骤如下：s1、将牛筋片(长10-30cm，宽10-30cm，厚1-5cm)与碳酸钠溶液置于清洗槽1中，并通过搅拌器搅拌清洗槽1内的牛筋片2h以上，然后排掉清洗槽1内的废液；s2、向清洗槽1内加入纯化水，用纯化水清洗牛筋片1h以上，然后排掉清洗槽1内的废液；s3、向清洗槽1内加入碳酸钠溶液，并通过搅拌器搅拌清洗槽1内的牛筋片2h以上，然后排掉清洗槽1内的废液；s4、向清洗槽1内加入纯化水用纯化水清洗牛筋片2.5h以上，然后排掉清洗槽1内的废液，完成牛筋片的清洗。实施例2的清洗流程及手工清洗方式的对比例2的清洗流程如下表6所示。表6实施例2和对比例2的清洗流程分别检测由实施例2和对比例2清洗后的牛筋片样品中的可溶性非胶原成分、微生物含量。一、考马斯亮蓝g250检测可溶性非胶原成分1、配制牛血清白蛋白标准液1mg/ml、配制考马斯亮蓝g250染色液(表7)。2、绘制标准曲线，在吸光度595nm处进行吸光值检测(表8)。表70-100ug/ml123456标准蛋白(ml)00.020.040.060.080.1纯化水(ml)10.980.960.940.920.9考马斯g250(ml)555555蛋白含量(ug/ml)020406080100表83、牛筋待测样品制备及检测牛筋与纯化水按1g:1ml的比例称量混合，放入摇床，30℃、100rpm、5h。检测结果如表9所示。表9样品a1a2a3浓度ug/ml对比例20.2170.2290.23018.29实施例20.2070.1990.19513.84二、微生物含量检测按照《中国药典》2015版进行检测，检测结果如表10所示。表10样品微生物含量(cuf/g)对比例270实施例2＜10实施例3本实施例提供一种利用槽型混合机中的搅拌器搅拌清洗牛筋片的方法。槽型混合机中的清洗槽1与搅拌器的结构与实施例1的相同。实施例3的清洗步骤如下：s1、将牛筋片(长10-30cm，宽10-30cm，厚1-5cm)与碳酸钠溶液置于清洗槽1中，并通过搅拌器搅拌清洗槽1内的牛筋片2h以上，然后排掉清洗槽1内的废液；s2、向清洗槽1内加入纯化水，用纯化水清洗牛筋片1h以上，然后排掉清洗槽1内的废液；s3、向清洗槽1内加入碳酸钠溶液，并通过搅拌器搅拌清洗槽1内的牛筋片2h以上，然后排掉清洗槽1内的废液；s4、向清洗槽1内加入纯化水用纯化水清洗牛筋片2.5h以上，然后排掉清洗槽1内的废液，完成牛筋片的清洗。实施例3的清洗流程及手工清洗方式的对比例3的清洗流程如下表11所示。分别检测由实施例3和对比例3清洗后的牛筋片样品中的可溶性非胶原成分、微生物含量。一、考马斯亮蓝g250检测可溶性非胶原成分1、配制牛血清白蛋白标准液1mg/ml、配制考马斯亮蓝g250染色液(表12)。2、绘制标准曲线，在吸光度595nm处进行吸光值检测(表13)。表11实施例3和对比例3的清洗流程表120-100ug/ml123456标准蛋白(ml)00.020.040.060.080.1纯化水(ml)10.980.960.940.920.9考马斯g250(ml)555555蛋白含量(ug/ml)020406080100表133、牛筋待测样品制备及检测牛筋与纯化水按1g:1ml的比例称量混合，放入摇床，30℃、100rpm、5h。检测结果如表14所示。表14样品a1a2a3浓度ug/ml对比例30.1120.1200.12513.97实施例30.0980.0890.0959.09二、微生物含量检测按照《中国药典》2015版进行检测，检测结果如表15所示。表15样品微生物含量(cuf/g)对比例320实施例3＜10由实施例1-3和对比例1-3清洗的牛筋片样品的测试数据汇总如下表16所示。表16非胶原成分、微生物含量这两个指标的检测结果均显示采用机器清洗方式的实施例1-3的清洗效果优于对比例1-3采用手工清洗方式的清洗效果。第一次试验，即实施例1和对比例1，使用少量牛筋，对20kg牛筋进行清洗，实施例1的清洗工艺为：试剂洗2h→纯化水洗2h→试剂2h→纯化水洗2.5h，其中试剂清洗的总时间为4h，与手工试剂清洗的总时间保持不变，由手工的1h*4次，改变为2h*2次的模式。试验结果显示，实施例1的清洗工艺是可行的，并且优于对比例1的手工清洗。第二次试验，即实施例2和对比例2，实施例2沿用实施例1的清洗工艺，将牛筋清洗数量增加到50kg。检测结果显示，实施例2的清洗工艺依旧可行。第三次实验，即实施例3和对比例3，实施例3对清洗工艺进行了微调。清洗的时间由原来的：试剂洗2h→纯化水洗2h→试剂洗2h→纯化水洗2.5h，调整为：试剂洗2h→纯化水洗1h→试剂洗2h→纯化水洗2.5h，减少了两次试剂清洗之间的水洗时间，从而减少了牛筋清洗的总时间，从原来的8.5h减少至7.5h。通过实验结果的显示，实施例3的清洗效果优于实施例1和实施例2的清洗效果。实施例1-3采用桨叶呈s型的搅拌器对清洗槽1中的牛筋片进行搅拌清洗，搅拌器的搅拌轴2水平设置，s型桨叶3推动牛筋片在清洗槽内上下翻滚及往复运动，模拟手工清洗的方式，促进试剂渗入牛筋片内部，再经过纯化水的漂洗，清除杂质及试剂，达到与手工清洗相同甚至更优的清洗效果。在其它实施方案中，以实施例1的清洗流程为基础，将搅拌器1的搅拌转速设在10-50rpm的范围内，且正向搅拌与反向搅拌的时间间隔设在5-30min的范围内，均可很好地搅动清洗槽1内的牛筋片；同时以浓度不低于0.01wt.％的碳酸钠溶液作为清洗剂清洗牛筋片，均可达到手工清洗的效果，符合生产标准。在其它实施方案中，清洗剂还可以采用氢氧化钠溶液，也可获得与碳酸钠溶液作为清洗剂时相当的清洗效果。所述氢氧化钠溶液的质量百分比浓度为0.001-0.1％。更优选地，所述氢氧化钠溶液的质量百分比浓度为0.01％本发明的清洗方法利用槽型混合机中的清洗槽及搅拌器对牛筋片进行机器清洗，可达到手工清洗的效果，且可节约时间、人力，清洗效率高。以上所述仅以实施例来进一步说明本发明的技术内容，以便于读者更容易理解，但不代表本发明的实施方式仅限于此，任何依本发明所做的技术延伸或再创造，均受本发明的保护。当前第1页1 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技术特征：
1.一种牛筋片的清洗方法，其特征在于，对牛筋片进行一阶清洗后，再对牛筋片进行至少一次二阶清洗；
所述一阶清洗包括以下步骤：
s1、将牛筋片与清洗剂置于清洗槽中，并通过搅拌器以正向搅拌和反向搅拌交替进行的方式搅拌清洗槽内的牛筋片2h以上，正向搅拌与反向搅拌的时间间隔为5-30min，搅拌转速为10-50rpm；然后排掉清洗槽内的废液；
s2、向清洗槽内加入纯化水，用纯化水清洗牛筋片1h以上，然后排掉清洗槽内的废液；
所述二阶清洗包括以下步骤：
s3、向清洗槽内加入清洗剂，并通过搅拌器以正向搅拌和反向搅拌交替进行的方式搅拌清洗槽内的牛筋片2h以上，正向搅拌与反向搅拌的时间间隔为5-30min，搅拌转速为10-50rpm；然后排掉清洗槽内的废液；
s4、向清洗槽内加入纯化水用纯化水清洗牛筋片2.5h以上，然后排掉清洗槽内的废液。
2.根据权利要求1所述的牛筋片的清洗方法，其特征在于，所述牛筋片的厚度为1-5mm，牛筋片的长和宽为10-30mm。
3.根据权利要求1所述的牛筋片的清洗方法，其特征在于，步骤s2中，向清洗槽内注入纯化水并以流动水冲洗的方式冲洗牛筋片30min，然后向清洗槽内加入纯化水以浸泡牛筋片并通过搅拌器搅拌清洗槽内的牛筋片。
4.根据权利要求3所述的牛筋片的清洗方法，其特征在于，步骤s2中，以流动水冲洗的方式冲洗牛筋片30min后，向清洗槽内加入纯化水以浸泡牛筋片并以正向搅拌和反向搅拌交替进行的方式通过搅拌器搅拌清洗槽内的牛筋片，正向搅拌与反向搅拌的时间间隔为20min，搅拌转速为10-50rpm，且每20min更换一次清洗槽内的纯化水。
5.根据权利要求1所述的牛筋片的清洗方法，其特征在于，步骤s4中，向清洗槽内注入纯化水并以流动水冲洗的方式冲洗牛筋片15min，然后向清洗槽内加入纯化水以浸泡牛筋片并通过搅拌器搅拌清洗槽内的牛筋片。
6.根据权利要求5所述的牛筋片的清洗方法，其特征在于，步骤s4中，以流动水冲洗的方式冲洗牛筋片15min后，向清洗槽内加入纯化水以浸泡牛筋片并以正向搅拌和反向搅拌交替进行的方式通过搅拌器搅拌清洗槽内的牛筋片，正向搅拌与反向搅拌的时间间隔为20min，搅拌转速为10-50rpm，且前三次更换清洗槽内的纯化水的时间间隔为20min，之后每30min更换一次清洗槽内的纯化水。
7.根据权利要求1所述的牛筋片的清洗方法，其特征在于，所述清洗剂是碳酸钠溶液或氢氧化钠溶液。
8.根据权利要求7所述的牛筋片的清洗方法，其特征在于，所述碳酸钠溶液的质量百分浓度为0.001-1.0％；所述氢氧化钠溶液的质量百分比浓度为0.001-0.1％。
9.根据权利要求8所述的牛筋片的清洗方法，其特征在于，步骤s1和s3中，碳酸钠溶液与牛筋片的体积比为1:1。
10.根据权利要求1所述的牛筋片的清洗方法，其特征在于，用桨叶呈s型的搅拌器搅拌清洗槽内的牛筋片，所述搅拌器的搅拌轴呈水平设置。
技术总结
本发明涉及胶原蛋白制备技术领域，具体为一种用于制备胶原蛋白的牛筋片的清洗方法。本发明通过以一定的搅拌速度并以一定时间间隔正向搅拌和反向搅拌交替搅拌浸泡在清洗剂中的牛筋片，实现了以搅拌器搅拌方式替代手工搓洗方式亦可保障牛筋片的清洗效果，牛筋片的清洁度符合生产要求。通过本发明方法清洗牛筋片，不仅牛筋片的清洁效果好，且极大的降低了清洗牛筋片的劳动强度，并因采用机械清洗取代手工清洗，可避免清洗试剂对操作人员的手部皮肤造成损伤，以及可避免清洗过程中由清洗牛筋片的操作人员引入其它微生物。
技术开发人、权利持有人：殷率;郑锦鸿;陈淡嫦;李奕恒;雷静;叶春婷
